Évaluation des taux d'IL-1β dans l'épilepsie et les lésions cérébrales traumatiques chez le chien

Évaluation des taux d'IL-1β dans l'épilepsie et les lésions cérébrales traumatiques chez le chien

juillet 2, 2019 0 Par admin
  • Article de recherche
  • Open Access

BMC Neuroscience 2019 20 : 29

https://doi.org/10.1186/s12868-019-0509-5

© L’auteur (s) 2019

  • Reçu le 30 janvier 2019
  • Accepté le 3 juin 2019
  • Publié:

Abstrait

Contexte

L’épilepsie est une maladie neurologique courante chez le chien qui touche environ 0,6 à 0,75% de la population canine. Il existe de nombreuses preuves de la présence de neuroinflammation dans l’épilepsie, créant de nouvelles possibilités pour le traitement de la maladie. Une augmentation de l’expression de l’interleukine-1 bêta (IL-1β) a été rapportée dans les foyers épileptogènes. Nous avons émis l’hypothèse d’une élévation de l’IL-1β dans le sérum et le LCR de chiens atteints d’épilepsie, ainsi que dans le sérum de chiens atteints de TBI, reflétant l’implication de cette cytokine dans la physiopathologie de l’épilepsie canine naturelle en milieu clinique.

Résultats

Les taux d’IL-1β ont été évalués dans le LCR et le sérum de six chiens en bonne santé et de 51 chiens atteints d’épilepsie (structurelle et idiopathique). Chez 16 chiens atteints de TBI, seul le sérum a été testé. Les concentrations d’IL-1β dans le LCR n’étaient pas détectables. Les valeurs sériques n’étaient pas élevées chez les chiens atteints de TBI par rapport aux témoins sains ( p > 0,05). Cependant, les chiens atteints d’épilepsie présentaient des taux élevés d’IL-1β dans le sérum ( p = 0,003), quelle que soit la cause sous-jacente de la maladie ( p = 0,0045). Il n’y avait pas de relation significative entre les variables et les niveaux d’IL-1β. Statistiquement perceptible ( p = 0,0630), environ 10% des chiens atteints d’épilepsie (R 2 = 0,105) présentaient une augmentation de la fréquence des crises et une élévation de l’IL-1β.

Conclusion

Des taux élevés d’IL-1β ont été détectés dans le sang périphérique chez des chiens atteints d’épilepsie idiopathique et structurelle, laissant supposer une inflammation de la pathophysiologie de l’épilepsie à prendre en compte dans la recherche de nouvelles stratégies thérapeutiques pour cette maladie. Cependant, pour mieux comprendre le rôle pathogène de cette cytokine dans l’épilepsie, il est souhaitable de poursuivre l’évaluation de l’IL-1β dans le tissu cérébral.

Mots clés

  • Beta d’interleukine-1
  • Épilepsie
  • Lésion cérébrale traumatique
  • Liquide cérébro-spinal
  • Sérum
  • Canin

Contexte

Les cytokines sont d’importantes molécules de signalisation [ 1 ] impliquées dans l’immunité, l’inflammation et l’hématopoïèse, mais également dans l’altération fonctionnelle des cellules du système nerveux central (SNC) [ 2 ]. Les cytokines sont bien connues pour influer fortement sur les processus de signalisation dans le SNC pendant une lésion, une inflammation ou une maladie [ 3 , 4 ]. Ils peuvent être pro- ou anti-inflammatoires [ 5 ].

L’interleukine 1 beta (IL-1β) appartient à la famille des cytokines pro-inflammatoires IL-1 et joue un rôle essentiel dans les lésions et l’inflammation [ 6 ]. Dans le SNC, il est principalement produit par la microglie activée [ 7 ], mais aussi par les neurones [ 8 ], les astrocytes [ 9 ] et les oligodendrocytes [ 10 ]. Il existe une connaissance sans cesse croissante de l’activité de cet interleukine dans le parenchyme cérébral sain et enflammé [ 11 ]. Dans le cerveau en bonne santé, les taux d’IL-1β sont faibles, mais détectables [ 12 ], ce qui suggère une certaine fonction dans la physiologie du SNC, comme le sommeil [ 13 , 14 ], l’apprentissage et la mémoire [ 15 ], ainsi que la neuromodulation à différents niveaux de cellules. communication dans le CNS [ 11 , 16 , 17 ]. Dans les maladies du SNC, l’implication de l’IL-1β est décrite dans la neurodégénérescence [ 18 , 19 ], la dépression [ 20 ], le neuro-traumatisme [ 21 ] et l’épilepsie [ 22 , 23 ]. Dans les processus inflammatoires chroniques et aigus du système nerveux central, il joue un rôle à la fois bénéfique et nocif [ 11 ] et pourrait donc constituer une cible pour le développement de médicaments [ 24 , 25 ].

L’épilepsie est une maladie neurologique courante chez le chien qui touche environ 0,6 à 0,75% de la population canine [ 26 ]. Les options thérapeutiques actuelles pour la maladie sont limitées et visent une réduction de la fréquence des crises épileptiques n’influant pas sur la physiopathologie [ 27 ]. Il existe de nombreuses preuves de la présence de neuroinflammation dans l’épilepsie [ 23 ]. L’implication potentielle de l’IL-1β dans les réactions inflammatoires de l’épilepsie a attiré une attention considérable et, malgré des rapports équivoques sur son implication dans les crises épileptiques [ 28 ], elle offre la possibilité de caractériser de nouvelles options de traitement [ 29 ]. Par exemple, on signale que le blocage de la signalisation de l’IL-1β empêche l’état épileptique chez les patients épileptiques [ 30 ].

Les lésions cérébrales traumatiques (TBI) sont considérées comme un problème de santé mondial et sont connues pour avoir des conséquences néfastes en médecine humaine [ 31 , 32 ] et vétérinaire [ 33 ], telles que les troubles cognitifs [ 34 ] ou le développement de l’épilepsie post-traumatique. Le TBI peut provoquer des réactions inflammatoires dans le cerveau [ 35 ] et par la suite conduire à l’épileptogenèse [ 23 , 36 ]. Il a été suggéré qu’une augmentation des taux d’IL-1β au cours d’une inflammation après un TBI avait une valeur prédictive pour le développement de l’épilepsie post-traumatique (EPT) [ 37 ].

En médecine vétérinaire, la concentration d’IL-1β dans le sang périphérique a été décrite comme un marqueur possible des stades précoces de l’inflammation chez le chien [ 38 ]. Une augmentation de l’expression de l’IL-1β dans le SNC a été rapportée chez des chiens atteints de lésion médullaire aiguë du plexus choroïde [ 39 ], dans les lésions cérébrales d’animaux infectés par le virus de la maladie de Carré [ 40 ] et dans le parenchyme cérébral de chiens atteints de TBI [ 41 ]. Chez les chiens atteints de myélopathie dégénérative, une diminution de l’IL-1β dans le plasma a été enregistrée [ 42 ].

Sur la base de l’implication rapportée de l’IL-1ß dans les modèles d’épilepsie et de la valeur prédictive potentielle de cette cytokine pour la PTE, l’objectif de cette étude était de déterminer le rôle possible de l’IL-1β dans l’épilepsie canine et le TBI. Par conséquent, la concentration d’IL-1β dans le sang périphérique de chiens atteints de lésion cérébrale traumatique et d’épilepsie a été étudiée, ainsi que sa présence dans le liquide céphalorachidien (LCR) de chiens atteints d’épilepsie à l’aide d’un dosage immuno-absorbant lié à l’enzyme (ELISA). Nous avons émis l’hypothèse d’une élévation de l’IL-1β dans le sérum de chiens atteints de TBI ainsi que dans le sérum et le LCR de chiens atteints d’épilepsie, reflétant ainsi l’implication de cette cytokine dans la physiopathologie de l’épilepsie canine naturelle en milieu clinique.

Résultats

La concentration en IL-1β a été évaluée chez 73 chiens inclus dans l’étude. Dans tous les échantillons de LCR (n = 57), l’IL-1β n’a pas pu être détectée à l’aide de l’ELISA décrit.

Chez les chiens sains (n ​​= 6), deux échantillons de sérum avaient des taux détectables d’IL-1β. La concentration moyenne, l’écart type et l’IL-1β dans ces échantillons de contrôle étaient de 14,8 ± 23,4 (0,0–58,0) pg / mL (tableau

1

).

Tableau 1

Valeurs moyennes de l’IL-1β dans le sérum (pg / ml)

Valeurs moyennes ± SD (plage)

14,8 ± 23,4 (0,0–58,0)

92,6 ± 75,1 (12,9 à 248,0)

118,6 ± 81,4 (0,0 à 312,0)

134,9 ± 79,2 (48,0 à 237,0)

154,2 ± 93,7 (37,5-308)

Chez tous les chiens présentant un TBI (n = 16), seuls les échantillons de sérum ont été évalués et dans tous les échantillons, l’IL-1β était mesurable. La valeur moyenne, l’écart-type et la plage de concentration en IL-1β dans le sérum des chiens atteints de TBI étaient de 92,6 ± 75,1 (12,9 à 248,0) pg / mL (tableau 1 ). Le score du MGCS variait de 3 à 18, le score moyen étant de 13 (écart-type = 4,01). Cependant, après avoir appliqué le test de Kruskal-Wallis pour comparer les niveaux d’IL-1β dans le sérum de chiens sains et de chiens atteints de TBI, il a été conclu qu’il n’y avait pas de différence significative entre ces deux groupes ( p > 0,5) malgré les valeurs uniques élevées.

Les animaux atteints d’épilepsie ont été divisés dans le groupe des épilepsies idiopathiques et structurelles. Chez tous les chiens (n ​​= 51), l’IL-1β était mesurable, à l’exception de deux personnes atteintes d’épilepsie idiopathique. Les animaux atteints d’épilepsie idiopathique présentaient des valeurs moyennes, l’écart-type et l’IL-1β sérique de 118,6 ± 81,4 (0,0–312,0) pg / mL (tableau 1 ). L’IL-1β présente dans le sérum de chiens atteints de maladie cérébrale inflammatoire et de tumeur cérébrale présentait les valeurs moyennes, la DS et l’intervalle de 134,9 ± 79,2 (48,0-237,0) pg / mL et de 154,2 ± 93,7 (37,5-308) pg / mL, respectivement ( Tableau 1 ).

Afin de comparer les niveaux d’IL-1β dans les échantillons sériques d’épilepsie à ceux de chiens en bonne santé, un test de Kruskal-Wallis pour la taille inégale de l’échantillon a été réalisé et a montré que les chiens atteints d’épilepsie tant idiopathique que structurale présentaient des taux plus élevés d’IL-1β dans le sérum que les chiens en bonne santé (

p

= 0,003; Figue.

1

une). Cependant, il n’y avait pas de différence statistique entre les niveaux d’IL-1β dans le groupe d’épilepsie structurelle et idiopathique (

p

> 0,05; Figue.

1

une). Le même test a été utilisé pour comparer les taux sériques d’IL-1β chez le chien en bonne santé à ceux des chiens atteints d’épilepsie idiopathique, de maladie cérébrale inflammatoire et de tumeurs cérébrales, et chaque groupe présentait des taux d’IL-1β supérieurs à ceux des témoins, quelle que soit la cause sous-jacente des crises. (

p

= 0,0045; Figue.

1

b.) Comparés les uns aux autres, il n’y avait pas de différence statistiquement significative entre les chiens atteints d’épilepsie idiopathique, de maladie cérébrale inflammatoire ou de néoplasie en ce qui concerne leurs taux d’IL-1β dans le sérum (

p

> 0,05; Figue.

1

b)

Fig. 1

a Niveaux d’interleukine-1 bêta (IL-1β) dans le sérum de chiens en bonne santé par rapport à des chiens atteints d’épilepsie idiopathique et structurelle et de lésion cérébrale traumatique. b Niveau de l’interleukine-1 bêta (IL-1β) dans le sérum de chiens en bonne santé par rapport à des chiens atteints d’épilepsie idiopathique et à des chiens présentant une inflammation et une tumeur au cerveau; les encadrés contiennent les valeurs du premier au troisième quartile des taux sériques d’IL-1β p / ml. Les lignes à l’intérieur de la boîte indiquent les valeurs médianes et ( ) représente les valeurs moyennes; Les lignes en dehors de la case indiquent une observation maximale (au dessus de la case) et minimale (sous la case); L’astérisque marque une différence statistiquement significative après correction de Bonferroni (* p p p

Une analyse de régression linéaire des taux d’IL-1β et du délai entre le prélèvement de l’échantillon et le dernier épisode de crise (moyenne = 4,3 jours, écart-type = 4,7) a donné

2

= 0.0014 et avec

p

= 0,8963 était statistiquement non significatif (Tableau

2

). Il en a été de même pour l’analyse de régression linéaire de la relation entre les niveaux d’IL-1β chez le chien épileptique et la durée de la maladie (moyenne = 95,2 jours, écart-type = 78,5, R

2

= 0,0097,

p

= 0,6112). Fait intéressant, l’analyse de régression linéaire des taux de L-1β et de la fréquence des crises a montré une relation perceptible sur le plan statistique, mais non significative, avec R

2

= 0,105 et

p

= 0,0630 (moyenne = 3,8 saisies par mois, ET = 3,4) (tableau

2

). Chez les chiens présentant différents types de crises, respectivement une gravité différente, aucune différence statistiquement significative (

p

= 0,7164) a été calculée à l’aide du test ANOVA unidirectionnel concernant les taux d’IL-1β (chez les chiens ayant des convulsions uniques: moyenne = 95,83 pg / mL, ET = 94,38; groupe: moyenne = 97,17 pg / mL, ET = 61,81 ; état épileptique: moyenne = 123,2 pg / mL, ET = 87,94).

Tableau 2

Analyse de l’IL-1β dans le sérum de chiens épileptiques et différentes variables

Temps écoulé entre le prélèvement de l’échantillon et la dernière crise (n = 14)

0,0014

0,8963

4,3 (4,7)

Durée de la maladie (n = 29)

0,0097

0,6112

95,2 (78,5)

Fréquence de saisie (n = 32)

0,105

0,0630

3,8 (3,4)

Type de saisie

n / a

0,7164

Célibataire (n = 12)

95,8 (94,38)

Saisies de grappes (n = 9)

97,17 (61,81)

Status epilepticus (n = 5)

123,2 (87,94)

Discussion

Dans la présente étude, l’IL-1β a été mesurée dans le sérum et le LCR de chiens atteints d’épilepsie, ce qui, à la connaissance des auteurs, est la première étude portant sur les chiens. Les taux d’IL-1β doivent être évalués pour prouver la survenue d’une réaction inflammatoire dans l’épilepsie canine. De plus, la concentration en IL-1β a également été mesurée dans le sérum de chiens TBI, ces animaux ayant tendance à développer une épilepsie post-traumatique [ 43 ].

Chez tous les chiens atteints d’épilepsie, ainsi que chez les chiens sains, l’IL-1β n’était pas mesurable dans le LCR en utilisant l’ELISA décrit. Sur la base de l’origine des métabolites dans le LCR, une association entre la présence d’IL-1β dans le LCR et le tissu cérébral aurait été hautement plausible et pourrait en dire plus sur le rôle de l’IL-1β dans l’épilepsie [ 28 ]. Cependant, dans la présente étude, comme dans le rapport chez l’homme, la faible sensibilité des tests ELISA, le temps écoulé entre le prélèvement de l’échantillon et le dernier épisode convulsif et différentes causes de la maladie ont probablement empêché la détection de la cytokine dans les échantillons de LCR. [ 28 ] L’intervalle de temps entre la dernière crise et le prélèvement de l’échantillon (valeur moyenne = 4,3 jours) ne semble pas avoir influencé les valeurs dans le sérum canin, ce qui est similaire à l’étude récente menée chez des patients humains [ 44 ]. En ce qui concerne les recherches vétérinaires sur d’autres maladies du système nerveux central, une autre tentative d’évaluation de l’IL-1β dans le LCR de chiens atteints de myélopathie dégénérative a échoué puisque les valeurs étaient inférieures à la limite de détection du test ELISA [ 42 ].

L’épileptogenèse est un sujet d’un grand intérêt scientifique. Une meilleure compréhension de ce processus offre de nombreuses possibilités de révéler la cause de la maladie et de nouvelles approches de traitement. Après un TCC grave, un pourcentage élevé de patients humains et canins développent une PTE (20% respectivement 14,3%) [ 43 , 45 ]. Au cours du processus de développement de la maladie, une augmentation de l’IL-1β survenant dans le tissu cérébral lésé a été décrite [ 36 , 46 ]. Nous nous sommes donc intéressés à mesurer la concentration d’IL-1β dans le TBI dans le sang périphérique et nous avons tenté de confirmer qu’un débordement du SNC se produisait dans les 2 premiers jours suivant la lésion et pouvait être évalué en clinique. Cependant, il n’y avait pas de différence statistique entre les valeurs sériques d’IL-1β chez les chiens en santé et les chiens atteints de TBI, bien que l’IL-1β soit mesurable dans chaque échantillon par rapport aux témoins. De plus, dans des cas isolés, des taux très élevés d’IL-1β ont été détectés. Quelques-uns de ces cas présentaient un score MGCS très faible, prédictif de l’issue défavorable (mort ou vivant) [ 47 ]. Néanmoins, sur la base de nos résultats, nous ne pouvions que spéculer sur le point de savoir si ces taux élevés d’IL-1β dans le sérum des cas isolés pourraient indiquer un développement potentiel de la PTE. En médecine humaine, les taux intracrâniens d’IL-1β sont significativement plus élevés que dans le plasma des patients atteints de TBI et la production de cytokines dans le SNC semble être très compartimentée [ 48 ]. Ceci pourrait expliquer les faibles taux d’IL-1β dans nos échantillons de sérum, malgré l’augmentation de sa production dans le cerveau rapportée par Yu, al. [ 41 ] Le nombre relativement faible de chiens TBI inclus dans notre étude ainsi que la population hétérogène quant à la gravité de la blessure pourraient également avoir affecté nos résultats. Nous sommes également conscients des limites de notre étude concernant l’utilisation d’une race pour les valeurs de référence. Cependant, Prachar et al. [ 38 ] ont également rapporté que quelques échantillons de sérum positifs pour IL-1β dans le groupe hétérogène de contrôle canin en bonne santé.

Les cytokines pro-inflammatoires et l’IL-1β sont potentiellement impliquées dans la physiopathologie de l’épilepsie [ 29 ]. Des recherches expérimentales ont associé la production d’IL-1β dans les zones cérébrales épileptogènes à une neuroinflammation aiguë puis ultérieure chronique dans l’épilepsie [ 23 ]. Partant du principe qu’il reflète l’inflammation liée à l’épilepsie, nous avons évalué les taux d’IL-1β dans le LCR et le sérum de chiens atteints d’épilepsie idiopathique et structurelle. Bien que la cytokine ne soit pas détectable dans le LCR, dans les échantillons de sérum de chiens atteints d’épilepsie, des taux significativement élevés ont été détectés par rapport aux témoins sains. Fait intéressant, il n’y avait pas de différence entre les chiens atteints d’épilepsie idiopathique et structurelle. Ce résultat remarquable suggère que quelle que soit la cause de l’épilepsie, l’IL-1β est élevée dans le sang. En outre, l’augmentation de l’IL-1β dans le sang de chiens atteints d’épilepsie confirme l’implication de l’inflammation dans la physiopathologie de la maladie. La neuroinflammation dans l’épilepsie présente une réponse inflammatoire du tissu cérébral à une activité neurogène, à savoir les convulsions [ 49 ]. Une telle réponse aiguë comprend la libération d’IL-1β et d’autres cytokines, qui peuvent à leur tour aider le cerveau à maintenir l’homéostasie ou à perpétuer et propager de manière néfaste l’inflammation chronique, la neuroexcitabilité et affaiblir la barrière hémato-encéphalique [ 50 ]. Les fuites de BBB qui pourraient survenir pourraient conduire à une augmentation du taux de IL-1β dans le sang [ 51 ], ce qui explique la cytokine détectée chez nos chiens épileptiques. La source d’IL-1β dans le sang périphérique pourrait également représenter un mélange entre la réponse centrale et périphérique du système immunitaire à l’épilepsie [ 37 ], par l’activation de la microglie et de monocytes périphériques.

Des taux élevés d’IL-1β dans le sérum ont été détectés et, en particulier, des cas isolés ont présenté des valeurs élevées, à la fois d’épilepsie structurelle et d’épilepsie idiopathique. Des cas présumés d’épilepsie idiopathique présumés, qui se sont révélés être à médiation immunitaire, ont été signalés en médecine humaine [ 52 ]. Cela pourrait expliquer la valeur élevée de l’IL-1β dans les cas uniques d’épilepsie idiopathique. Des résultats similaires ont été trouvés en évaluant l’IL-17 dans le sérum et le LCR de chiens atteints d’épilepsie idiopathique [ 53 ]. Néanmoins, une association supplémentaire avec différentes variables de l’épilepsie était nécessaire pour mieux expliquer le rôle de la cytokine. Considérant que les crises présentent le dénominateur commun pour les trois groupes d’épreuves épileptiques évaluées, leur association avec les taux d’IL-1β a été évaluée au moyen des variables suivantes: intervalle de temps entre le prélèvement de l’échantillon et le dernier épisode de crise, durée de la maladie, fréquence des crises, et type de saisie resp. sévérité des crises. Cependant, aucune relation significative entre les variables et les niveaux d’IL-1β n’a pu être calculée. Néanmoins, il était statistiquement notable ( p = 0,0630) qu’environ 10% des chiens souffrant d’épilepsie (R 2 = 0,105) avaient une fréquence de crises accrue et une élévation de l’IL-1β. Des résultats similaires ont été décrits en médecine humaine et la relation entre la fréquence des crises et la production d’IL-1β est apparue [ 44 , 54 ]. Quoi qu’il en soit, des rapports controversés sur le rôle exact et le mécanisme de l’influence de l’IL-1β sur les crises épileptiques [ 28 , 51 ]. Le fait qu’il n’y ait pas de relation entre le niveau d’IL-1β et le moment de la collecte de l’échantillon ou la durée de la maladie pourrait être expliqué par une éventuelle inflammation chronique constante sans fluctuations du niveau d’IL-1β. De plus, Gao et al. ont suggéré qu’il n’y avait pas d’altération intercritique et post-critique du niveau de la cytokine dans le sang périphérique dans l’épilepsie [ 44 ]. Aucune différence entre les types de crises en ce qui concerne les niveaux d’IL-1β n’a pu être prouvée, bien que ces différences puissent être mieux évaluées dans la première heure après l’événement [ 55 ].

Conclusion

Dans ceDans notre étude, nous avons détecté une augmentation de l’IL-1β dans le sérum de chiens atteints d’épilepsie, quelle qu’en soit la cause. Il est toujours difficile de trouver de nouvelles options de traitement de l’épilepsie, en tenant compte de multiples étiologies et différences interindividuelles [

Méthodes a> h2>

                

Inclusion d’animaux et collecte d’échantillons h3>                 

L’étude comprenait des échantillons appariés de sérum et de LCR parmi six beagles en bonne santé, 51 chiens atteints d’épilepsie et 16 de TBI, présentés entre 2013 et 2016 à la clinique pour petits animaux de l’université de médecine vétérinaire de Hanovre, en Allemagne. Dr. Diana Henke, de la faculté Vetsuisse de l’Université de Berne, a gracieusement fourni six échantillons de TBI. Les échantillons des chiens malades ont été collectés après accord écrit du propriétaire. Le plan de l’étude suivait les directives éthiques de l’Université et les procédures concernant les chiens en santé étaient approuvées par les autorités de Basse-Saxe (numéro expérimental sur l’animal 33.9-42502-05-14A453). P>                 

>

Les chiens ont été sélectionnés en fonction de historique et données de diagnostic disponibles. Tous les animaux participant à l’étude ont subi un examen clinique et neurologique, une analyse de sang complète et différentes études d’imagerie. En fonction du diagnostic présumé ou confirmé, les chiens ont été répartis dans les groupes suivants: épilepsie idiopathique, épilepsie structurelle, TBI, en bonne santé (tableau p> 3

). p>

Tableau 3                         

Groupes de chiens selon le diagnostic p>                        div> figcaption>

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Épilepsie idiopathique p> td>

Crises convulsives et général intercrit normal , examens neurologiques, IRM et LCR; n = 30 p> td> tr>

Épilepsie structurelle p> td>

Convulsions et maladie cérébrale inflammatoire présumée; n = 9 p> td> tr>

Maladies cérébrales néoplasiques; n = 12 p> td> tr>

TBI p> td>

Historique de la tête blessures, examens cliniques, neurologiques et d’imagerie; n = 16 p> td> tr>

Sain p> td>

Physique normal et examen neurologique; n = 6 p> td> tr> tbody> table> div> figure> div>                 

22 femmes, 10 chiens femelles stérilisés, 35 chiens mâles et 6 chiens mâles stérilisés. L’âge des chiens était compris entre 6 mois et 14 ans et diverses races étaient regroupées avec dix races différentes, neuf beagles, trois Border Collies, trois Golden Retrievers et divers, comme Bull Terrier, Dachshund, bouledogue français, Jack Russel Terrier, Labrador. Retriever, husky sibérien, poseur irlandais, berger allemand, berger australien. P>                 

Le groupe de contrôle était composé de personnes en bonne santé appartenant à une clinique. beagles avec examen clinique et neurologique normal, valeurs sanguines normales et analyse du LCR normale. p>                 

Les chiens souffrant d’épilepsie ont été classés avec ou présumé Épilepsie structurelle ou idiopathique confirmée selon les recommandations du Groupe de travail international sur l’épilepsie vétérinaire pour un diagnostic standardisé [ 57 span>]. Les données cliniques concernant les convulsions chez les chiens épileptiques, telles que leur type, leur durée et leur fréquence, ont été collectées à partir des observations du propriétaire et / ou du neurologue (cas hospitalisés). P>                 

Pour diagnostiquer l’épilepsie idiopathique ( n = 30) chez les chiens le niveau 2 de confiance a été appliqué [ 57 span>]: les animaux avaient des antécédents de deux crises épileptiques non provoquées ou plus, âge au début de la maladie compris entre 6 mois et 6 ans, examen général et neurologique intercritique non remarquables, résultats de tests sanguins, de tests urinaires, d’échographies et de radiographies, ainsi que des analyses IRM et LCR normales . Des données cliniques telles que la durée de la maladie, la fréquence des crises, la gravité des crises (crises épileptiques uniques ou généralisées, statut épileptique), le délai entre le prélèvement de l’échantillon et la dernière crise ont été enregistrées. P>                 

Le groupe de chiens souffrant d’épilepsie structurelle composé d’animaux atteints d’une maladie inflammatoire du SNC (huit chiens atteints de méningo-encéphalite d’origine inconnue (MUO) et d’un d’encéphalite bactérienne) et d’un néoplasme du tissu cérébral causant vraisemblablement les convulsions observées. p>                 

Tous les animaux diagnostiqués comme souffrant d’épilepsie structurelle (n = 21) ont subi un examen physique et neurologique, des analyses de sang, ainsi que des tests IRM et du LCR. Le diagnostic présumé s’est ensuivi à la suite des recommandations [ 58 span>] de diagnostiquer l’une ou l’autre des tumeurs au cerveau [ 59 span>] ou d’inflammation du cerveau [ Dans l’étude, 16 chiens atteints de TBI ont été incluses. Une lésion cérébrale traumatique a été diagnostiquée lorsque les antécédents du chien indiquaient une blessure récente à la tête (3–48 h), un examen physique et neurologique complet et les résultats d’imagerie correspondants [ 61 span>]. Le niveau de conscience, la motricité et les fonctions cérébrales de chaque chien atteint de TBI ont été évalués à l’aide de l’échelle de Glasgow modifiée (MGCS) [ 62 span>]. Le MGCS est une échelle clinique de coma pour les chiens. Les cas de TBI les moins graves présentaient le score MGCS le plus élevé (MGCS = 18) et les cas les plus graves un score MGCS de «3». P>                 

Dans tous les chiens épileptiques et les chiens en bonne santé, Le LCR a été obtenu par ponction sous-occipitale lors d’une anesthésie générale. Du sang de veine saphène et céphalique a été recueilli, centrifugé à 14 000 tr / min pendant 2 min et le sérum séparé. Chez les chiens atteints de TBI, seul le sérum a été testé. En cas de blessure à la tête, une ponction dans le LCR pourrait entraîner une détérioration des signes cliniques. De telles procédures sont par conséquent contre-indiquées. 61 span> ]. Des échantillons de sang ont été prélevés chez les chiens atteints d’un TCC 3 à 48 heures après la blessure et ont été orientés vers les cliniques. Tous les échantillons ont été immédiatement aliquotés, congelés et conservés à – 20 ° C jusqu’à la mesure. P>                section>

                

Détermination de l’IL-1β h3>                 

L’IL-1β a été mesurée dans l’appariement Le LCR et les échantillons de sérum de chiens épileptiques et sains, ainsi que dans le sérum d’animaux atteints de TBI. P>                 

La concentration en IL-1β a été évaluée à l’aide de un test ELISA spécifique au chien (kit n ° SEA563Ca; Cloud-Clone Corp, Houston TX, États-Unis). La méthode ELISA de type sandwich a été réalisée conformément au manuel d’instruction du fabricant. En bref, dans les puits pré-revêtus avec un anticorps spécifique de l’IL-1β, 100 µl d’échantillon ont été ajoutés, suivis d’un anticorps conjugué à la biotine, spécifique de l’IL-β. Ensuite, de l’avidine conjuguée à la peroxydase de raifort est ajoutée et incubée. Lorsque du substrat 3,3 ‘, 5,5′-tétraméthylbenzidine (TMB) est ajouté, seuls les puits contenant l’anticorps conjugué à la biotine, IL-1β et l’avidine conjuguée à une enzyme ont changé de couleur. Après avoir ajouté de l’acide sulfurique, le changement de couleur du produit final a été mesuré à l’aide d’un lecteur de plaques (lecteur multi-mode Synergy 2, BioTek, Vermont, USA). La densité optique mesurée a ensuite été comparée aux valeurs de la courbe standard et exprimée en pg / ml. La plage de détection du test allait de 7,8 à 500 pg / ml. La dose minimale détectable était de 3,1 pg / ml. P>                section>

                

Analyse statistique h3>                 

Toutes les analyses statistiques ont été effectuées à l’aide d’un programme statistique package SAS ® sup>, version 9.2 (SAS Institute, Cary, NC, États-Unis). Les données sur l’IL-1β ne suivent pas une distribution normale. Par conséquent, des tests statistiques non paramétriques ont été utilisés et les différences entre tous les groupes ont été évaluées à l’aide du test de Kruskal-Wallis et de la correction post-hoc de Bonferroni. D’abord, tous les groupes d’animaux ont été comparés à des chiens en bonne santé et les uns aux autres. Ensuite, tous les chiens épileptiques ensemble ont été comparés au TBI et au groupe en bonne santé. Les valeurs moyennes avec écart type ont été calculées pour chaque groupe évalué. La présentation graphique des résultats a été réalisée à l’aide de GraphPad Prizm 6 (GraphPad Software, Inc., La Jolla, États-Unis). P>                 

Pour associer les concentrations d’IL-1β à sérum aux paramètres importants de l’épilepsie, une analyse de régression linéaire a été réalisée pour les variables suivantes: durée de la maladie, fréquence des crises, délai entre le prélèvement de l’échantillon et le dernier épisode de crise. La relation a été décrite avec le coefficient de détermination, R-carré (R 2 sup>). Les niveaux d’IL-1β ont été comparés entre des groupes présentant différents types de crises, respectivement la gravité des crises (crises uniques, en grappes ou status epilepticus) en appliquant le test ANOVA à une voie. p>                section> div> section>           

Abréviations h2 >

                

ELISA: dfn> dt>

                    

Essai d’immunosorbant lié à une enzyme p >                    dd> dl>                 

IL-1β: dfn> dt>

                    

interleukine-1 bêta ​​p>                    dd> dl>                 

CNS: dfn> dt>

                    

système nerveux central p>                    dd> dl>                 

CSF: dfn> dt>

                    

liquide céphalorachidien p>                    dd> dl>                 

PTE: dfn> dt>

                    

épilepsie post-traumatique p>                    dd> dl>                 

SCI: dfn> dt>

                    

lésion de la moelle épinière p>                    dd> dl>                 

TBI: dfn> dt>

                    

lésion cérébrale traumatique p>                    dd> dl>                 

TMB: dfn> dt>

                    

3,3ʹ, 5,5ʹ- tétraméthylbenzidine p>                    dd> dl>                 

MGCS: dfn> dt>

                    

modification de l’échelle de coma de Glasgow p>                    dd> dl>                 

IRM: dfn> dt>

                    

imagerie par résonance magnétique p>                    dd> dl>                 

MUO: dfn> dt>

                    

méningoencéphalite d’origine inconnue p>                    dd> dl>                div> div> section>

Déclarations h2>

Remerciements h3>

Les auteurs souhaitent remercier leurs collègues du département de médecine et de chirurgie des petits animaux de l’Université de médecine vétérinaire de Hanovre en Allemagne et du département de médecine vétérinaire clinique de l’Université de Berne pour leur aide dans l’évaluation des chiens et la collecte d’échantillons. P > div>

Financement h3>

Cette recherche n’a reçu aucune subvention spécifique des agences de financement publi c, secteurs commerciaux ou à but non lucratif. Le premier auteur était soutenu financièrement par «Bruns Stiftung» et «Die Gesellschaft zur Förderung Kynologischer Forschung». La source de financement de l’auteur n’a eu aucune influence sur la conduite de la recherche et / ou la préparation de l’article. P> div>

Contributions des auteurs h3>

La conceptualisation, l’administration et la rédaction-édition ont été effectuées par AT; Prélèvement d’échantillons: DK, DH; Analyse d’échantillon: DK, RC; L’enquête et l’écriture ont été effectuées par DK; L’analyse statistique a été réalisée par KR et DK. Tous les auteurs ont lu et approuvé le manuscrit final. P> div>

              

                

Approbation éthique et consentement à participer h3>                 

Le plan de l’étude suivait les directives éthiques de l’université et les procédures concernant les chiens en santé étaient approuvées par les autorités de la Basse-Saxe (numéro expérimental sur l’animal 33.9-42502-05-14A453). Les échantillons inclus dans l’étude ont été prélevés dans le cadre des soins standard. Les propriétaires de chaque chien ont donné leur consentement pour que leur chien soit inclus dans l’étude. Le consentement était suffisant, selon les directives éthiques de la fondation, Université de médecine vétérinaire de Hanovre. P>                div>               

                

Consentement à la publication h3>                 

Non applicable. p>                div>               

                

Intérêts concurrents h3>                 

Les auteurs déclarent ne pas avoir d’intérêts divergents. p>                div>              div>

Libre accès strong> Cet article est distribué selon les termes de la licence internationale Creative Commons Attribution 4.0 ( http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/ span>), qui permet une utilisation, une distribution et une reproduction sans restriction sur tout support, à condition que vous donniez le crédit voulu à l’auteur ou aux auteurs d’origine et à la source, fournissez un lien vers la licence Creative Commons et indiquer si des modifications ont été apportées. Dérogation à la déduction de Creative Commons Public Domain (> a a href = « http://creativecommons.org/publicdomain/zero/1.0/ » target = « _blank »> http://creativecommons.org/publicdomain/zero/1.0/ span> span>) s’applique aux données mises à disposition dans cet article, sauf indication contraire. p>

Note de l’éditeur h3>

Springer Nature reste neutre en ce qui concerne les revendications de juridiction dans les cartes publiées et les affiliations institutionnelles. p> apart> div> section> div>

id = « Aff » xmlns = «  » xmlns: fn = « http://www.w3.org/2005/xpath-functions » xmlns: meta = « http://www.springer.com/app/meta »>

Auteurs ‘Affiliations h2>

(1) span>

Département de médecine des petits animaux and Surgery, Université de médecine vétérinaire de Hanovre, Fondation, Buenteweg 9, 30559 Hannover, Allemagne p> div>

(2) span>

Adresse actuelle: span> Clinique vétérinaire am Hasenberg, Stuttgart, Allemagne div>

> span> (3) span>

Institut de biométrie, d’épidémiologie et de traitement de l’information, Université de médecine vétérinaire, Hanovre, Allemagne p> div>

(4) span>

Centre pour la neuroscience des systèmes, Hanovre, Allemagne p> div> div> section> div>

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